项目成员：刘子萌  山颖童  李婷婷  曹文硕  毕香凝  

指导教师：刘玉冬  王小丹

作品简介：研究Sentrin特异性蛋白酶1 （SENP1）对小鼠缺血再灌注肾损伤后肾脏修复的作用及机制。方法：将C57BL/6J小鼠分为空白对照组、假手术组、假手术+空载体组、模型组（IRI）、IRI+SENP1低表达组、IRI+SENP1过表达组。本研究肾脏损伤修复模型的构建采用双侧肾动脉夹闭法，应用无创动脉夹夹闭双侧肾蒂30分钟、再灌注14天，假手术组仅游离肾蒂、不予夹闭。为研究干扰SENP1基因表达对小鼠肾脏损伤后修复的作用，制备用于体内感染的SENP1shRNA和SENP1过表达的重组腺病毒，分别于IRI术前24小时感染小鼠。以Real-time PCR和Western Blot检测SENP1 mRNA和蛋白表达变化，通过血肌酐、尿素氮水平评估肾功能，通过PAS和Masson染色评估组织形态学改变，通过免疫组化检测肾脏纤维化指标变化。结果：与IRI组相比，IRI+SENP1低表达组肾组织病理损害较重，Collagen III和α-SMA蛋白表达皆显著增加，血肌酐和尿素氮水平明显升高（P<0.05），而IRI+SENP1高表达组肾脏病理损害明显减轻，Collagen III和α-SMA蛋白表达明显减少，血肌酐和尿素氮水平显著降低（P<0.05）。结论：SENP1可以阻抑急性肾损伤后的肾脏纤维化进程并促进肾脏修复。

图1 项目实施路线                        

 图2 大鼠缺血性急性肾损伤模型形态变化

图3 SENP1的表达变化（免疫荧光双染法证明发生缺血性损伤时）

图4 小鼠肾脏HI1α、VEGF通路表达变化（干扰SENP1基因表达）

项目创新点：

（1）本项目从苏素化/去苏素化修饰这一新角度，解析 AKI-to-CKD 肾小球病变 进展的分子机制，目前尚未见文献报道。

（2）本项目首次提出并验证 SENP1介导的 HIF通路去苏素化修饰对 AKI-to-CKD进展中的肾小球损伤发挥保护作用的学术观点。

项目视频：